Il Test Molecolare COVID-19, conosciuto comunemente come Tampone Molecolare, è l'esame diagnostico di riferimento internazionale per la rilevazione del coronavirus SARS-CoV-2. Questo esame identifica tracce specifiche del genoma del coronavirus a partire da un tampone naso-faringeo, quindi conferma la presenza di infezione in soggetti sintomatici, pre-sintomatici o asintomatici. Il campione di secrezioni respiratorie viene processato con una tecnica di biologia molecolare chiamata real time RT-PCR (reverse transcription (rt)-Real Time PCR), che combina due PCR: prima una RT-PCR e, successivamente, una Real Time PCR per la rilevazione del genoma (RNA) del virus SARS-CoV-2.

 

Per sensibilità e specificità analitica e clinica, è l'esame "gold standard" per la diagnosi di COVID-19: rileva il genoma (RNA) del virus SARS-CoV-2 nel campione biologico, quindi fornisce conferma dell'infezione.

Tampone Molecolare COVID-19: Come Funziona?

La PCR (dall'inglese "Polymerase Chain Reaction", Reazione a Catena della Polimerasi) è una tecnica che permette di clonare, quindi moltiplicare, in provetta segmenti selezionati di DNA tramite cicli di sintesi ripetuti, utilizzando inneschi specifici e la DNA polimerasi. Come risultato, la reazione a catena della polimerasi amplifica una regione selezionata di un genoma, "purificando" efficacemente questo DNA dal restante genoma. Ciascun ciclo di PCR raddoppia la quantità di DNA sintetizzato nel ciclo precedente, quindi sono necessari 20-30 cicli per un'amplificazione efficace (da cui il termine "reazione a catena").

Il metodo PCR è estremamente sensibile: può rivelare una singola molecola di DNA in un campione; tracce di RNA possono essere analizzate nello stesso modo, trascrivendole prima in DNA con la Trascrittasi Inversa (RT-PCR, dall'inglese "Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction").

La RT-PCR combinata con la Real-Time PCR permette di stabilire i livelli di espressione di specifici RNA: la trascrizione inversa produce DNA complementare a singolo filamento, detto cDNA, che può essere quantificato dopo ogni ciclo di amplificazione.

  • La fase di RT-PCR, Reazione a Catena della Polimerasi (PCR) dopo Retro-Trascrizione (RT, detta anche trascrizione inversa), converte le molecole di RNA (+) di SARS-CoV-2 nelle loro sequenze di DNA complementare a singolo filamento (cDNA) mediante trascrittasi inversa;
  • Successivamente, sui cDNA ottenuti, si effettua la Real Time PCR che ha valenza diagnostica vera e propria, in quanto amplifica e quantifica contemporaneamente il DNA presente, mantenendo inalterati i rapporti relativi di concentrazione dell'RNA virale di SARS-CoV-2.

Per questo motivo, la rt-Real Time PCR è utilizzata nella diagnosi di COVID-19 (seppur con indicazioni qualitative, così come descritto dagli organi internazionali di riferimento): il test molecolare è in grado di rilevare il patogeno anche a bassa carica virale in soggetti sintomatici, pre-sintomatici o asintomatici.

Ad oggi, il test molecolare su tampone nasofaringeo od orofaringeo è riconosciuto e validato a livello nazionale ed internazionale per sensibilità e specificità, in linea con le indicazioni riportate dalla World Health Organization (WHO) per il controllo della pandemia di COVID-19.

polymerase chain reaction test infographic 23 2148550121 min

Quando va fatto il Tampone Molecolare

Gli obiettivi del test molecolare su tampone naso-faringeo sono:

  • La ricerca del virus nel contesto delle indagini cliniche ed epidemiologiche di soggetti con sintomatologia compatibile con una infezione da SARS-CoV-2, inclusi i contatti stretti sintomatici;
  • La definizione della guarigione dei casi positivi.

Il test molecolare su tampone naso-faringeo è la prima scelta nei seguenti contesti:

  • Caso sospetto sintomatico con o senza link epidemiologico;
  • Soggetto in quarantena se compare sintomatologia (es. contatto stretto di caso confermato);
  • Contatto stretto di caso confermato che vive o frequenta regolarmente soggetti fragili a rischio di complicanze o soggetti non collaboranti;
  • Asintomatico per ricovero programmato, ingresso in larghe comunità chiuse laddove previsto (es. RSA, prigioni, strutture per soggetti con disabilità mentale ecc.);
  • Screening degli operatori sanitari/personale in contesti ad alto rischio;
  • Soggetto in isolamento per la conferma di guarigione;
  • Contatto asintomatico in quarantena per la chiusura a 10 giorni.

Il test molecolare viene utilizzato per confermare i casi positivi al test rapido antigenico su tampone naso-faringeo nei seguenti casi:

  • Asintomatico che effettua il test su base volontaria, esame richiesto per motivi di lavoro o di viaggio (fatte salve specifiche prescrizioni dei paesi di destinazione che possano prevedere specificatamente test molecolare) o per richieste non correlate a esigenze cliniche o di salute pubblica ricadenti nei casi precedenti ecc.;
  • Screening di comunità (ricerca di persone con infezione in atto in un gruppo esteso di persone) per motivi di sanità pubblica.

In Cosa Consiste il Tampone Molecolare

La tecnica di esecuzione del test molecolare prevede un prelievo semplice e rapido di materiale biologico da naso e gola. Il test molecolare viene effettuato su un campione di cellule superficiali, muco e secrezioni respiratorie, generalmente prelevate con un tampone naso-faringeo, quindi attraverso la narice e/o la faringe.

La raccolta del campione viene eseguita inserendo un bastoncino ovattato, simile ad un cotton-fioc, sterile e flessibile, attraverso la narice, fino a quando non viene incontrata una resistenza in corrispondenza del retro della rinofaringe. Segue la lieve e delicata rotazione del tampone, quindi il bastoncino viene estratto e inserito in un apposito contenitore. La stessa procedura viene ripetuta a livello della faringe.

Per la complessità della metodica, viene eseguita da operatori esperti esclusivamente presso laboratori altamente specializzati di riferimento regionali e laboratori aggiuntivi identificati/autorizzati secondo le modalità e le procedure concordate con il Laboratorio di Riferimento Nazionale dell'Istituto Superiore di Sanità.

Esito del Test Molecolare: dopo quanto è disponibile?

La risposta è disponibile dopo circa 36 ore dal prelievo; indicativamente, dall'arrivo in laboratorio, l'esecuzione dell'analisi rt-Real Time PCR da tampone naso-faringeo richiede un tempo minimo di 3-5 ore. Chiaramente, va considerato che i tempi variano molto in base alla strumentazione in uso nel laboratorio analisi, alle situazioni organizzative e logistiche, quindi al personale disponibile e alla quantità di tamponi da processare in un dato momento.

tampone molecolare naso faringeo

Interpretazione dei Risultati del Tampone Molecolare 

L'esito del tampone molecolare COVID-19 può essere:

  • Positivo: indica che una persona ha contratto il virus e l'infezione è in atto al momento del prelievo;
  • Negativo: indica che la persona non ha contratto il virus, quindi non risulta l'infezione da SARS-CoV-2 al momento del prelievo.

Un RISULTATO POSITIVO al tampone molecolare COVID-19 significa che:

  • L'infezione è ancora in atto;
  • La persona deve rimanere in quarantena fino all'esito di due tamponi negativi, a 24 ore di distanza;
  • Il medico di famiglia deve monitorare l'evoluzione dell'infezione.

Dopo l'esecuzione del tampone, la persona in attesa del risultato del test molecolare deve essere posta in quarantena. Se il risultato del test è positivo, subentra l'obbligo di isolamento per la persona interessata e viene disposto lo screening dei contatti stretti (familiari, colleghi, compagni di scuola ecc.) per i quali viene disposta la quarantena. L'esito "positivo" in Italia viene obbligatoriamente segnalato alle autorità sanitarie competenti, per consentire un allineamento tra risultati dei test e azioni di sanità pubblica da parte del Dipartimento di Prevenzione (DdP).

"Positivo" non necessariamente significa "sintomatico": alcune persone hanno contratto il virus, ma non manifestano sintomi (i cosiddetti "asintomatici").

Test Molecolare negativo: cosa significa?

Un RISULTATO NEGATIVO al tampone molecolare COVID-19 significa che:

  • Non è stata rilevata la presenza di SARS-CoV-2, quindi l'infezione non è stata contratta.

Un tampone negativo, dopo un positivo può indicare che:

  • Il soggetto non è più contagioso;
  • Ha incontrato il virus, ma lo ha anche già debellato e non rischia di trasmetterlo;
  • Può concludere l'isolamento domiciliare, rispettando però le regole precauzionali di limitazione del contagio nella vita sociale/lavorativa (distanziamento sociale, mascherine e igiene delle mani), poiché non è ancora nota la durata dell'immunità.

Affidabilità del Tampone Molecolare

Il tampone molecolare è attualmente il più affidabile per la diagnosi di COVID-19: il test è altamente specifico per SARS-CoV-2 e la sensibilità del tampone è mediamente del 98% (in pratica, su 100 persone infettate un tampone molecolare ne individua correttamente 98).

 

Per effettuare il Tampone Molecolare Covid19, vieni a trovarci in uno dei nostri laboratori, ti ricordiamo che ci saranno in vigore le misure di prevenzione anticontagio. Se vuoi fare un'indagine più approfondita sul tuo stato di salute approfitta dei nostri pacchetti checkup.

 

Contattaci per avere maggiori informazioni o per prenotare un esame.

Se ti è piaciuto l'articolo, convividilo sui social, conoscere meglio gli argomenti di medicina e salute è un'aiuto nella nostra battaglia per la prevenzione!